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      光學、電子顯微鏡分辨率的區別及提高

      1、光學、電子顯微鏡分辨率的區別及提高
      (1)光學顯微鏡與電子顯微鏡分辨率的區別電子顯微鏡是顯微光學一次革命,它使顯微光學的最小分辨間距從0.2um 提高到0.2~0.3 納米,使人類能夠看到一排排原子陣列的晶格結構,從而極大地提高了人類研究微觀世界的能力,而光學顯微鏡和電子顯微鏡最大分辨率不同的原理是所使用波長不同,前者使用可見光,分辨率最高達0.1 微米級,最高放大倍率只能到1600 倍左右。后者使用電子,根據物質波波長理論,在幾十千伏至幾百千伏的電壓加速下,可使電子顯微鏡的分辨率達到納米級,比光學顯微鏡的分辨率高千倍。
      (2)提高光學顯微鏡和電子顯微鏡分辨率的方法
      提高光學顯微鏡分辨率的方法。根據分辨率的計算公式:D=0.61λ/N.A.,可知提高光學顯微鏡分辨率的方法有三種:①減低波長??梢姽庾疃滩ㄩL0.39μm,若用0.13μm 的紫外線作光源,則會比普通顯微鏡提高3 倍以上??墒怯捎谧贤饩€顯微鏡的透鏡材料需特殊材質(透過紫外線的材料)制造,加之紫外線顯微鏡不能用肉眼直接觀察,只能通過攝制顯微鏡照片進行分析,這樣就限制了紫外線顯微鏡的應用。②增大折射率。一般顯微鏡的物鏡分為低倍物鏡(2×、4×、10×等)、高倍物鏡(40×、45×等)、水浸物鏡(63×)、油浸物鏡(90×、100×)等。低倍物鏡也叫干燥系物鏡,其介質是空氣,折射率是1;水浸物鏡介質是蒸餾水,其折射率為1.33;油浸物鏡介質是香柏油或其它透明油,其折射率一般在1.52 左右,接近透鏡和載玻片的折光率。水浸物鏡和油浸物鏡不僅放大倍數高而且由于使用高折射率的介質,分辨率也高。③加大物鏡的鏡口率來提高分辨力。數值孔徑(鏡口率)公式為:N.A=n.sinα 式中:n—物鏡與標本之間的介質析射率;α—物鏡的鏡口角。如低倍物鏡指1×~6×,NA 值為0.04~0.15;中倍物鏡指6×~25×,NA 值為0.15~0.40;高倍物鏡指25×~63×,NA 值為0.35~0.95;而油浸物鏡指90 ×~100 × ,NA 值可達1.25~1.40。由此可見,那NA 值越大,說明顯微鏡物鏡的鏡口率越大,D 值越小,分辨力越高,物象越清楚。
       

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